實(shí)驗(yàn)室電泳技術(shù)根據(jù)其核心原理——即分離物質(zhì)所依據(jù)的主要驅(qū)動(dòng)力和介質(zhì)——可以分為以下幾大類(lèi)。其中，瓊脂糖凝膠電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳是經(jīng)典的兩種，分別屬于篩分型電泳的不同分支。

以下是按照實(shí)驗(yàn)方法的分類(lèi)詳解：

一、按分離原理（驅(qū)動(dòng)力/介質(zhì)）分類(lèi)

1、區(qū)帶電泳

這是常用的一類(lèi)，在一種連續(xù)、均勻的緩沖液（支持介質(zhì)）中進(jìn)行。樣品分子被分離成獨(dú)立的、不連續(xù)的區(qū)帶。我們常說(shuō)的凝膠電泳大多屬于此類(lèi)。

（1）核心：使用支持介質(zhì)（如瓊脂糖、聚丙烯酰胺）來(lái)減少對(duì)流和擴(kuò)散，提高分辨率。

（2）示例：瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、毛細(xì)管區(qū)帶電泳。

2、等電聚焦

（1）分離依據(jù)：蛋白質(zhì)（或其他兩性分子）的等電點(diǎn)。

（2）原理：在凝膠中建立一個(gè)穩(wěn)定的、線性的pH梯度。當(dāng)施加電場(chǎng)時(shí)，蛋白質(zhì)會(huì)遷移至其凈電荷為零的位置，即其等電點(diǎn)處，并聚焦成一條極窄的帶。分辨率高。

（3）應(yīng)用：主要用于分析蛋白質(zhì)的微異質(zhì)性和測(cè)定等電點(diǎn)。

3、等速電泳

（1）分離依據(jù)：分析物的有效淌度。

（2）原理：使用不連續(xù)的電解質(zhì)系統(tǒng)，由前導(dǎo)電解質(zhì)（離子淌度高）和尾隨電解質(zhì)（離子淌度低）組成。樣品離子的淌度介于兩者之間。分離后，各組分形成獨(dú)立的、相鄰的區(qū)帶，并以相同的速度移動(dòng)。

（3）特點(diǎn)：區(qū)帶界面清晰，可用于定量，但操作較復(fù)雜。

（4）應(yīng)用：毛細(xì)管電泳中應(yīng)用較多。

4、免疫電泳

（1）分離依據(jù)：抗原的電泳遷移率和與其抗體的特異性免疫反應(yīng)。

（2）原理：進(jìn)行常規(guī)區(qū)帶電泳將抗原分離，然后在與電泳方向平行的槽中加入相應(yīng)抗體，進(jìn)行雙向擴(kuò)散。在抗原抗體比例適宜處形成可見(jiàn)的沉淀弧。

（3）應(yīng)用：用于檢測(cè)和鑒定復(fù)雜混合物中的特定抗原（蛋白質(zhì)）。

5、雙向電泳

（1）分離依據(jù)：在兩個(gè)維度上使用不同的分離原理。

（2）原理：這是蛋白質(zhì)組學(xué)的核心技術(shù)。

（3）一向：基于電荷的分離，通常使用等電聚焦。

（4）二向：基于分子量大小的分離，使用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳。

（5）結(jié)果：蛋白質(zhì)點(diǎn)分布在二維圖譜上，可以同時(shí)分離數(shù)千種蛋白質(zhì)。

二、按支持介質(zhì)（凝膠類(lèi)型）分類(lèi)

這是常見(jiàn)的日常分類(lèi)方式，直接決定了實(shí)驗(yàn)方法的選擇。

1、瓊脂糖凝膠電泳

（1）介質(zhì)：瓊脂糖（天然多糖）。

（2）特點(diǎn)：

孔徑大，分辨率相對(duì)較低。

制備簡(jiǎn)單快捷，無(wú)毒。

操作電壓較低。

（3）主要應(yīng)用：分離大分子核酸（DNA、RNA），片段大小通常在0.1kb - 50kb。

（4）方法變種：脈沖場(chǎng)凝膠電泳（用于分離超大DNA分子）。

2、聚丙烯酰胺凝膠電泳

（1）介質(zhì)：聚丙烯酰胺（化學(xué)合成聚合物）。

（2）特點(diǎn)：

孔徑小且可精確調(diào)控（通過(guò)改變單體濃度）。

分辨率高，可達(dá)單堿基差異。

需要化學(xué)聚合（通常用AP和TEMED），有神經(jīng)毒性。

可耐受高電壓，分離速度快。

（3）主要應(yīng)用：分離小片段核酸（如DNA測(cè)序、小RNA）和蛋白質(zhì)。

（4）核心方法變種：

天然PAGE：分離依據(jù)為分子大小、形狀和電荷。用于分析天然蛋白質(zhì)或核酸復(fù)合物。

變性PAGE：

SDS-PAGE：在蛋白質(zhì)樣品和凝膠中加入SDS和還原劑，使蛋白質(zhì)變性并帶上大量負(fù)電荷，分離僅基于分子量。這是分析蛋白質(zhì)分子量的金標(biāo)準(zhǔn)。

尿素-PAGE：用于分離單鏈核酸或RNA，變性劑為尿素。

3、非凝膠支持介質(zhì)電泳

（1）紙電泳：使用濾紙作為支持介質(zhì)，現(xiàn)已較少使用。

（2）醋酸纖維素薄膜電泳：常用于臨床血清蛋白分析，速度快，但分辨率不高。

三、按儀器形式分類(lèi)

1、平板電泳（水平/垂直）

（1）水平電泳：常用于瓊脂糖凝膠電泳。凝膠水平放置于緩沖液槽中。

（2）垂直電泳：常用于聚丙烯酰胺凝膠電泳。凝膠垂直夾在兩塊玻璃板之間，緩沖液槽位于上下兩端。

2、毛細(xì)管電泳

（1）介質(zhì)：在極細(xì)的熔融石英毛細(xì)管中進(jìn)行，管內(nèi)充滿緩沖液。

（2）原理：分離在毛細(xì)管內(nèi)的自由溶液中進(jìn)行，依靠電滲流和溶質(zhì)的電泳淌度進(jìn)行分離。

（3）特點(diǎn)：

自動(dòng)化程度高，樣品用量少。

分辨率高，分析速度快。

可在線檢測(cè)。

（4）類(lèi)型：包含毛細(xì)管區(qū)帶電泳、毛細(xì)管等電聚焦、毛細(xì)管凝膠電泳等多種模式，廣泛應(yīng)用于核酸、蛋白質(zhì)、小分子離子和手性分子分析。

結(jié)論：在實(shí)驗(yàn)室中，“按實(shí)驗(yàn)方法分類(lèi)"通常意味著根據(jù)研究目的選擇合適的凝膠類(lèi)型和電泳模式。例如，要分析PCR產(chǎn)物，就會(huì)選擇瓊脂糖凝膠電泳；要分析蛋白質(zhì)分子量，就會(huì)選擇SDS-PAGE；要進(jìn)行精細(xì)的蛋白質(zhì)分離，則可能采用雙向電泳。