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PCR儀，細胞計數(shù)儀，熒光計，紫外分光光度計，離心機，電泳儀電泳槽，化學(xué)發(fā)光凝膠成像系統(tǒng)，移液器，顯微鏡，醫(yī)用藥品冷藏箱
推薦產(chǎn)品Recommended products
伯樂CFX Opus 96進行實時熒光定量PCR實驗，所需的試劑和耗材可以系統(tǒng)地分為以下幾大類：
一、伯樂CFX Opus96實時熒光定量PCR系統(tǒng)核心反應(yīng)試劑
1、qPCR預(yù)混液（Master Mix）
（1）種類：根據(jù)檢測方法選擇。
（2）染料法：如SYBR Green qPCR Master Mix（含有SYBR Green I染料、Hot-Start DNA聚合酶、dNTPs、Mg2?、緩沖液等）。伯樂也推薦使用其自家的SsoAdvanced Universal SYBR Green Supermix，其性能與CFX系列儀器經(jīng)過優(yōu)化匹配。
（3）探針法：如TaqMan探針法專用的Master Mix。伯樂對應(yīng)的產(chǎn)品是SsoAdvanced Universal Probes Supermix。
關(guān)鍵點：務(wù)必確認(rèn)預(yù)混液是否包含ROX等被動參考染料。CFX Opus 96等伯樂儀器不需要添加ROX進行孔間信號校正，因此應(yīng)選擇不含ROX或“For ROX-free instruments"的預(yù)混液。
2、引物與探針
（1）染料法：需要特異性上游和下游引物。
（2）探針法：需要特異性上游和下游引物以及標(biāo)記了熒光報告基團和淬滅基團的寡核苷酸探針（如TaqMan探針）。
3、模板DNA/cDNA
純化好的基因組DNA、逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA或質(zhì)粒DNA等。
4、Nuclease-Free Water
無核酸酶水，用于稀釋和調(diào)整反應(yīng)體系體積。
二、伯樂CFX Opus96實時熒光定量PCR系統(tǒng)耗材類
1、qPCR反應(yīng)板/八聯(lián)管
（1）96孔反應(yīng)板：常用。必須使用光學(xué)級透明的qPCR專用板，確保透光性和熱傳導(dǎo)性。板有平蓋和凸蓋之分，需根據(jù)儀器配備的加熱蓋壓力模式選擇（CFX Opus 96通常使用平蓋）。
（2）八聯(lián)管：靈活性高，適合樣本量少的實驗。同樣需使用光學(xué)級透明管和對應(yīng)的平蓋/圓蓋。
（3）提示：強烈建議使用伯樂原裝或認(rèn)證兼容的耗材（如Hard-Shell® 96孔板），以獲得良好的光學(xué)性能和熱循環(huán)一致性。
2、光學(xué)密封膜
用于密封96孔板，防止蒸發(fā)和污染。必須是光學(xué)透明的密封膜，且能與孔板牢固粘合，在熱循環(huán)過程中不起皺、不翹邊。微孔板封板膜或光學(xué)封板膜是標(biāo)準(zhǔn)選擇。
三、伯樂CFX Opus96實時熒光定量PCR系統(tǒng)輔助試劑與耗材
1、RNA提取試劑（如需從RNA開始）：如TRIzol、柱式提取試劑盒等。
2、逆轉(zhuǎn)錄試劑（如需做RT-qPCR）：包含逆轉(zhuǎn)錄酶、隨機引物/oligo dT、dNTPs、RNase抑制劑等的試劑盒。
3、稀釋液：用于標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋，通?？捎肨E緩沖液或nuclease-free water。
4、實驗室通用耗材：
無菌、無核酸酶離心管（0.2mL PCR管，1.5mL，2.0mL）
帶濾芯槍頭（防止氣溶膠污染，規(guī)格如10μL， 200μL， 1000μL）
微型離心機
渦旋振蕩器
冰盒
四、質(zhì)量控制與標(biāo)準(zhǔn)品
1、陽性對照：已知含有目標(biāo)序列的模板。
2、陰性對照：
無模板對照：用水代替模板，監(jiān)測體系污染。
無逆轉(zhuǎn)錄對照：用于RT-qPCR，監(jiān)測基因組DNA污染。
3、標(biāo)準(zhǔn)品：用于制作標(biāo)準(zhǔn)曲線、定量分析。通常是已知濃度的梯度稀釋模板（質(zhì)粒、PCR產(chǎn)物、合成寡核苷酸等）。
