產(chǎn)品分類PRODUCT CLASSIFICATION
推薦產(chǎn)品Recommended products
你的位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 選擇biorad伯樂(lè)CFX Opus96實(shí)時(shí)熒光定量QPCR有哪些關(guān)鍵參數(shù)參考
技術(shù)文章選擇伯樂(lè)(Bio-Rad)CFX Opus 96 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀時(shí),需要重點(diǎn)關(guān)注以下關(guān)鍵參數(shù)和特性,以確保它能滿足您的實(shí)驗(yàn)需求和預(yù)算。可以將這些參數(shù)分為三個(gè)核心維度:硬件性能、光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)、軟件與合規(guī)性。
一、伯樂(lè)CFX Opus96實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀硬件性能參數(shù)
1、樣品通量與模塊類型:
(1)96孔:標(biāo)準(zhǔn)配置,一次最多運(yùn)行96個(gè)樣本(或更多,如果使用雙模塊版)。需確認(rèn)是標(biāo)準(zhǔn)96孔板還是低容板(如96-well twin.tec),后者可減少試劑消耗。
(2)模塊可更換性:CFX Opus 96的亮點(diǎn)之一是模塊可互換。您可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要,快速更換不同的模塊(例如,從標(biāo)準(zhǔn)96孔模塊換到384孔模塊)。這極大地?cái)U(kuò)展了儀器的靈活性。因此,需要關(guān)注模塊的兼容性與價(jià)格。
2、溫控系統(tǒng):
(1)升降溫速率:通常 > 4-5°C/秒。更高的速率可以縮短循環(huán)時(shí)間,提高效率。
(2)溫度均一性:這是QPCR數(shù)據(jù)可靠性的關(guān)鍵。伯樂(lè)的帕爾貼溫控技術(shù)和的散熱設(shè)計(jì)(如右側(cè)散熱)保證了出色的孔間溫度均一性(通常宣稱在±0.1°C以內(nèi))。查看其溫度梯度功能的性能,可用于優(yōu)化退火溫度。
(3)熱蓋溫度:可調(diào)熱蓋(通常可達(dá)105-110°C),能有效防止頂部冷凝,尤其適用于低反應(yīng)體積。
二、伯樂(lè)CFX Opus96實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀
1、激發(fā)與檢測(cè)通道:
(1)通道數(shù)量:CFX Opus 96標(biāo)準(zhǔn)配置為4通道+1參比通道。這意味著單次運(yùn)行最多可同時(shí)檢測(cè)4種不同的熒光染料(如FAM, HEX/VIC, ROX/Texas Red, Cy5)。
(2)光源:采用長(zhǎng)壽命LED作為激發(fā)光源,取代了傳統(tǒng)的鹵鎢燈,更穩(wěn)定、壽命更長(zhǎng)(宣稱>20,000小時(shí))、無(wú)需預(yù)熱。
(3)檢測(cè)器:高靈敏度光電二極管。關(guān)注其靈敏度(可檢測(cè)低拷貝模板的能力)和動(dòng)態(tài)范圍(通??煽缭?0個(gè)數(shù)量級(jí))。
2、濾光片系統(tǒng):
(1)濾光片配置:檢查每個(gè)通道對(duì)應(yīng)的激發(fā)/發(fā)射濾光片波段,確保與您常用的熒光染料(如SYBR Green, TaqMan探針等)匹配。伯樂(lè)的儀器通常預(yù)設(shè)了優(yōu)化的濾光片組。
(2)多色檢測(cè)能力:對(duì)于多重qPCR,優(yōu)異的通道串?dāng)_控制和光譜校正功能至關(guān)重要。確保儀器軟件有強(qiáng)大的多組分校正功能。
三、伯樂(lè)CFX Opus96實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀軟件與合規(guī)性參數(shù)
1、操作軟件:
(1)CFX Maestro軟件:這是配套的核心軟件。評(píng)估其用戶界面是否直觀、實(shí)驗(yàn)設(shè)置流程是否便捷(如創(chuàng)建板布局、定義探針/染料)、數(shù)據(jù)分析工具是否強(qiáng)大(如自動(dòng)基線閾值設(shè)定、多種定量方法、熔解曲線分析、基因表達(dá)分析等)。
(2)云連接與遠(yuǎn)程監(jiān)控:CFX Opus系列支持云連接,可以通過(guò)手機(jī)或電腦遠(yuǎn)程監(jiān)控實(shí)驗(yàn)進(jìn)度、接收完成通知,非常方便。
2、合規(guī)性與驗(yàn)證:
(1)21 CFR Part 11合規(guī)性:如果您的實(shí)驗(yàn)室需要滿足FDA的電子記錄和電子簽名法規(guī)(如在制藥、臨床診斷領(lǐng)域),務(wù)必確認(rèn)儀器和軟件提供相應(yīng)的合規(guī)性選件包。
(2)性能驗(yàn)證工具:儀器是否提供或推薦配套的驗(yàn)證試劑盒(如已知濃度梯度的DNA模板),用于定期驗(yàn)證儀器的精度、準(zhǔn)確度和線性范圍。
(3)數(shù)據(jù)導(dǎo)出格式:能否方便地導(dǎo)出為通用格式(如.csv, .xlsx),以便用其他軟件(如GraphPad Prism)進(jìn)行進(jìn)一步統(tǒng)計(jì)分析。
四、總結(jié)與選購(gòu)建議
關(guān)鍵參數(shù)核查清單:
1、基礎(chǔ)需求:模塊類型(96孔/384孔?是否可換?)、4色檢測(cè)通道是否夠用?
2、性能核心:溫控均一性數(shù)據(jù)、光學(xué)系統(tǒng)靈敏度(尤其對(duì)弱表達(dá)基因)、多重檢測(cè)的串?dāng)_水平。
3、操作體驗(yàn):CFX Maestro軟件易用性、是否支持遠(yuǎn)程監(jiān)控。
4、長(zhǎng)期合規(guī):是否需要21 CFR Part 11功能?售后驗(yàn)證支持如何?
5、性價(jià)比:除了主機(jī)價(jià)格,還需考慮:可選模塊的價(jià)格、軟件升級(jí)費(fèi)用、保修期限和服務(wù)合同。