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技術文章

ThermoFisher賽默飛QuantStudio3實時熒光定量PCR系統(tǒng)做實驗用的耗材試劑

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這是一個非常經(jīng)典和普及的qPCR平臺,其耗材和試劑生態(tài)系統(tǒng)非常成熟??偟膩碚f,您需要準備以下幾大類:


一、賽默飛QuantStudio3實時熒光定量PCR儀核心耗材

1、微孔板

0.2 mL 96孔板:這是常用的格式。有單孔獨立式和8聯(lián)排管式。

材質(zhì):通常為聚丙烯,確保熱傳導效率和化學兼容性。

選擇建議:

標準板:用于大多數(shù)實驗。

光學透明封口膜:必須與板配套使用,密封板子以防止蒸發(fā)和污染。有預切割的粘性膜和熱封膜兩種。

8聯(lián)排管:靈活性高,適合樣本數(shù)量不多的實驗,可以單獨使用每個排管。

2、基座和托架

標準96孔基座:隨儀器標配,用于放置0.2 mL的96孔板或8聯(lián)排管。

96孔板透明托架:如果您使用獨立的8聯(lián)排管,需要將這個托架放入基座中,以固定排管的位置。


二、賽默飛QuantStudio3實時熒光定量PCR儀核心試劑

1、染料法

染料(如SYBR Green)會嵌入所有雙鏈DNA中發(fā)出熒光,成本較低,使用簡便。

推薦賽默飛品牌:

PowerUp™ SYBR™ Green Master Mix:這是目前的主力產(chǎn)品,包含了所有必需組分(熱啟動Taq酶、dNTPs、緩沖液、SYBR Green染料、ROX校正染料等),即開即用,性能穩(wěn)定。

SYBR™ Select Master Mix:另一款高性能的預混液,同樣包含所有組分。

關鍵點:QuantStudio 3需要使用ROX作為被動參比染料來校正孔與孔之間的熒光信號誤差。上述預混液都已包含ROX,無需額外添加。

2、探針法

使用序列特異性的探針(如TaqMan探針),特異性更高,適合多重檢測。

推薦賽默飛品牌:

TaqMan™ Fast Advanced Master Mix:快速循環(huán)預混液,能顯著縮短實驗時間,且包含所有組分。

TaqMan™ Universal Master Mix II:經(jīng)典的探針法預混液,適用性廣。

關鍵點:除了預混液,您還需要向賽默飛或其它供應商訂購針對您目標基因的特異性TaqMan探針引物套裝。


三、輔助耗材與試劑

1、酶水:用于稀釋引物、配制反應體系。必須是分子生物學級別,無DNA酶、RNA酶。

2、引物:針對您的目標基因設計的特異性引物。

3、模板DNA:您要定量的樣品DNA,通常是反轉(zhuǎn)錄得到的cDNA(如果是RNA定量)。

4、實驗室通用耗材:

移液器及無菌帶濾芯吸頭:確保精確移液和防止氣溶膠污染。

微型離心機:用于離心混勻反應液。

渦旋振蕩器。

冰盒:用于放置對溫度敏感的試劑。

手套:防止污染。


四、最后建議:

1、新手入門:強烈建議從SYBR Green染料法開始,使用PowerUp™ SYBR™ Green Master Mix 和兼容的96孔板,這是最直接、成本效益高的組合。

2、渠道:訪問賽默飛世爾科技,在搜索框中輸入“QuantStudio 3 consumables"或上述試劑名稱,可以找到最準確的產(chǎn)品列表、說明書信息。

TEL:18016231680

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