QuantStudio 3 在設(shè)計上能夠進行長時間的實驗，例如在運行標準96孔板時，一個典型的qPCR程序本身就需要1.5到2.5小時。儀器本身具備連續(xù)運行24小時甚至更久的硬件能力。

然而，能否順利實現(xiàn)24小時連續(xù)運行，關(guān)鍵在于實驗設(shè)計、樣品和試劑穩(wěn)定性以及無人值守的風險管理。以下是詳細的解釋和注意事項：

一、支持24小時運行的理由

1、硬件設(shè)計：儀器的加熱塊、光學檢測系統(tǒng)和控制軟件都支持長時間運行。您可以輕松設(shè)置一個循環(huán)數(shù)多、退火/延伸時間長的程序，總時長超過24小時。

2、軟件支持：QuantStudio Design and Analysis 軟件允許您設(shè)置并運行長達數(shù)天的實驗程序。

二、實現(xiàn)24小時連續(xù)運行的關(guān)鍵前提與注意事項

1、反應(yīng)體系蒸發(fā)問題（最關(guān)鍵！）

必須使用光學蓋膜或封板膜：不能直接使用普通的板蓋。需要使用專門的熱封膜（如 MicroAmp™ Optical Sealing Film）或光學透明的粘性封板膜，并用相應(yīng)的封板器將其緊密密封，防止在長時間高溫循環(huán)中液體蒸發(fā)，導致反應(yīng)失敗和儀器污染。

驗證密封性：確保封膜沒有褶皺或未封緊的區(qū)域。

2、試劑和酶的穩(wěn)定性

使用長效酶：普通的Taq酶在長時間高溫循環(huán)下可能會失活。如果您計劃運行一個非常長的程序（例如超過3-4小時），強烈建議使用為“長片段PCR"或“長時間擴增"設(shè)計的特殊酶 mix，這些酶具有更好的熱穩(wěn)定性。

Mix的穩(wěn)定性：確保您使用的預(yù)混液（Master Mix）制造商沒有標明不適用于超長運行時間。

3、實驗設(shè)計的合理性

循環(huán)數(shù)：通常40個循環(huán)已經(jīng)足夠檢測絕大多數(shù)模板。設(shè)置過高的循環(huán)數(shù)（如60-80循環(huán)）不僅不必要，還可能增加背景噪音和蒸發(fā)風險。請根據(jù)您的模板濃度合理設(shè)置循環(huán)數(shù)。

程序步驟時間：延長退火/延伸時間會增加總運行時間。請確認您的擴增片段長度是否需要這么長的延伸時間。

4、無人值守的風險

電力保障：確保實驗室供電穩(wěn)定，有UPS（不間斷電源）支持，防止意外斷電導致實驗中斷和數(shù)據(jù)丟失。

儀器狀態(tài)：在離開前，確認儀器運行正常，沒有報錯信息。

環(huán)境溫度：確保儀器周圍通風良好，環(huán)境溫度不會過高。

三、總結(jié)與建議

1、可以做到：QuantStudio 3 在技術(shù)上能夠單次連續(xù)運行24小時。

2、不推薦常規(guī)化：除非有特殊實驗需求（如使用特殊的長片段酶），否則不建議常規(guī)設(shè)計單次長達24小時的qPCR程序。更好的做法是優(yōu)化實驗方案，縮短運行時間，或采用分批上樣的間歇式運行。

3、如果必須進行：

嚴格密封：使用高質(zhì)量的光學密封膜和封板器。

選擇穩(wěn)定試劑：確認并使用熱穩(wěn)定性更高的酶。

進行預(yù)實驗：先用少量樣本進行一次長時間運行的預(yù)實驗，驗證擴增效率和結(jié)果是否可接受。

做好風險管理：確保電力穩(wěn)定，并告知實驗室相關(guān)人員。

4、總而言之，將QuantStudio 3用于24小時連續(xù)運行在技術(shù)上是可行的，但成功與否高度依賴于您對蒸發(fā)控制和試劑穩(wěn)定性的管理。 在嘗試之前，請務(wù)必仔細評估這些風險。