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技術(shù)文章

thermofisher賽默飛ST4臺式通用高速離心機使用案例

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賽默飛ST4系列離心機(如 ST 4、ST 4R、ST 4R Plus)是實驗室中非常經(jīng)典和常見的一款微量高速離心機。它以其緊湊的設(shè)計、高速性能和多功能性而聞名,廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)、細胞生物學(xué)、生物化學(xué)等領(lǐng)域。


一、案例一:分子生物學(xué) - 質(zhì)粒DNA提取與PCR產(chǎn)物純化

1、應(yīng)用背景:

在分子克隆實驗中,經(jīng)常需要快速離心來收集、純化微量的DNA樣品,例如在堿裂解法提取質(zhì)粒DNA的步驟中,或使用離心柱法純化PCR產(chǎn)物時。

2、具體操作:

沉淀DNA: 在質(zhì)粒提取過程中,加入異丙醇或乙醇沉淀DNA后,需要將DNA離心至管底。

純化步驟: 在使用離心柱純化試劑盒時,幾乎所有步驟都離不開微量離心機:

結(jié)合: 將裂解液與結(jié)合緩沖液混合后,轉(zhuǎn)移到離心柱中,12,000 rpm離心30-60秒,使DNA結(jié)合到膜上。

洗滌: 加入 wash buffer 后,同樣以 12,000 rpm 離心 30-60秒,棄去廢液。

洗脫: 最后加入洗脫液(Elution Buffer或水),MAX 轉(zhuǎn)速(如13,000 rpm或14,000 rpm)離心60秒,將純化的DNA收集到新的EP管中。

3、ST4的優(yōu)勢體現(xiàn):

高速: MAX 轉(zhuǎn)速可達15,000 rpm以上,能產(chǎn)生足夠的離心力(>25,000 x g)確保微量液體中的DNA被甩下并緊密結(jié)合/洗脫。

快速啟動/停止: 提速和降速都很快,非常適合這種短時、高頻次的離心操作,極大提高了實驗效率。

適配性: 標配的轉(zhuǎn)子(如8x2.0mL固定角轉(zhuǎn))適配1.5mL/2.0mL EP管和常見的離心柱。


二、案例二:細胞生物學(xué) - 細胞培養(yǎng)物的快速離心

1、應(yīng)用背景:

在細胞傳代、收集細胞或需要快速終止反應(yīng)(如去除培養(yǎng)液中的藥物)時,需要快速沉降細胞。

2、具體操作:

細胞傳代: 將培養(yǎng)瓶中的細胞懸液轉(zhuǎn)移到15mL離心管中,使用ST4配套的適配器(Adapter),可以容納15mL和50mL錐形底離心管。

離心參數(shù): 以 2,000 - 3,000 rpm 離心 3-5 分鐘,使細胞形成堅實的沉淀。

收集上清或細胞: 離心后,可以輕松地倒掉或吸走上清培養(yǎng)基,留下細胞沉淀用于后續(xù)的重懸和傳代。

3、ST4的優(yōu)勢體現(xiàn):

通用性: 通過更換不同的轉(zhuǎn)子和適配器,ST4可以處理從0.2mL PCR管到50mL錐形管的多種容器,實現(xiàn)“一機多用"。

Gentle模式(部分型號): 對于某些嬌嫩的細胞,ST4R等型號提供的“Gentle"升/降速模式可以避免劇烈的加減速對細胞造成機械損傷。

節(jié)省空間: 相比于大型落地離心機,ST4體積小巧,可以輕松放入超凈工作臺或生物安全柜內(nèi),方便進行無菌操作。


三、案例三:生物化學(xué) - 蛋白質(zhì)沉淀與快速分離

1、應(yīng)用背景:

在提取總蛋白或需要濃縮蛋白樣品時,常用三(TCA)或丙酮沉淀蛋白質(zhì),隨后需要高速離心來收集蛋白沉淀。

2、具體操作:

沉淀反應(yīng): 在細胞裂解液或蛋白樣品中加入沉淀劑,冰浴反應(yīng)一段時間。

離心收集: 將混合物轉(zhuǎn)移到1.5mL EP管中,使用預(yù)冷(4°C)的ST4離心機,以 MAX 轉(zhuǎn)速(14,000 rpm或更高)離心15-20分鐘。

清洗: 棄去上清,加入預(yù)冷的丙酮清洗沉淀,再次高速離心。

溶解: 最后晾干沉淀,用適當(dāng)?shù)木彌_液重溶蛋白沉淀。

3、ST4的優(yōu)勢體現(xiàn):

制冷功能(ST4R/Plus型號): 這是關(guān)鍵優(yōu)勢。ST4R和Plus型號帶有制冷系統(tǒng),可以在4°C下運行,有效防止離心過程中產(chǎn)熱導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性或降解,對于溫度敏感的生化實驗至關(guān)重要。

高離心力: 能產(chǎn)生強大的離心力,確保微小的蛋白沉淀被緊密地壓實到管底,方便去除上清。


四、總結(jié):賽默飛ST4離心機的核心優(yōu)勢

1、高速與高離心力:MAX 轉(zhuǎn)速可達15,200+ rpm,產(chǎn)生25,830 x g的RCF,能高效沉淀微量樣品。

2、緊湊與通用性 :體積小巧,通過更換多種轉(zhuǎn)子和適配器,可處理0.2mL至50mL的樣品管。

3、溫度控制(R/Plus) :制冷型號可在4°C下運行,保護溫度敏感性樣品。

4、操作簡便與快速 :快速的加速/減速,預(yù)設(shè)程序、Short Spin按鈕,大大提升工作效率。

5、安全與穩(wěn)定:具備蓋鎖、轉(zhuǎn)子識別、不平衡檢測等安全功能,運行平穩(wěn),噪音低。

TEL:18016231680

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