Qubit 4.0熒光計在檢測核酸（DNA/RNA）濃度時，通常比傳統(tǒng)的紫外吸收法（如NanoDrop）更靈敏、更特異，尤其在低濃度樣本或復(fù)雜樣品中優(yōu)勢明顯。以下是具體對比：

一、靈敏度對比

1、Qubit 4.0

檢測下限 ：DNA/RNA：低至 0.5 pg/μL（高靈敏度）

線性范圍 ：較窄（適合精準(zhǔn)定量低濃度樣本）

樣本體積 ：僅需 1-20 μL

2、紫外吸收法（NanoDrop等）

檢測下限 ：通常 2-5 ng/μL（依賴樣品純度）

線性范圍 ：較寬（可測高濃度樣本，但低端不準(zhǔn)）

樣本體積 ：需 1-2 μL（但易受污染物干擾）

二、特異性對比

1、Qubit 4.0：

基于熒光染料（如dsDNA BR Assay），特異性結(jié)合目標(biāo)分子（如雙鏈DNA、單鏈DNA或RNA），幾乎不受游離核苷酸、蛋白質(zhì)、鹽類等干擾。

適合：痕量樣本（如單細(xì)胞測序、cfDNA）、污染物多的樣本（如粗提物）。

2、紫外吸收法：

通過A260吸光度計算濃度，但會受雜質(zhì)干擾（如蛋白質(zhì)A280、酚類A270、胍鹽等），導(dǎo)致假性偏高。

適合：快速估算高純度樣本（如柱提后的DNA/RNA）。

三、適用場景

1、優(yōu)先選擇Qubit 4.0：

需要高精度（如NGS文庫定量）。

樣本濃度極低（如環(huán)境DNA、微量提取物）。

樣本含污染物（如胍鹽、酚、蛋白質(zhì)）。

2、紫外吸收法的優(yōu)勢：

快速檢測（無需染料孵育）。

可同時評估純度（A260/A280、A260/A230比值）。

四、注意事項

1、Qubit的局限性：

需使用特定熒光染料（成本較高）。

每次檢測需標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn)。

無法區(qū)分DNA和RNA（除非使用RNA特異性染料）。

2、紫外吸收法的風(fēng)險：

污染物可能導(dǎo)致濃度虛高（如鹽離子也會吸收260 nm光）。

五、總結(jié)

1、靈敏度：Qubit 4.0顯著優(yōu)于紫外法，尤其對低濃度樣本（＜10 ng/μL）。

2、準(zhǔn)確性：Qubit受干擾更少，結(jié)果更可靠。

3、效率：紫外法更快，適合初步篩查。