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技術文章

thermo賽默飛Qubit4.0熒光計定量 DNA、RNA、蛋白質

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Qubit 4.0熒光計是Thermo Fisher Scientific公司推出的一款高靈敏度、高特異性的定量儀器,專用于精確測量DNA、RNA、蛋白質等生物分子的濃度。以下是其核心特點和使用方法的總結:


一、適用檢測類型

1、核酸定量

DNA:dsDNA(雙鏈)、ssDNA(單鏈)、microRNA、小片段DNA(如NGS文庫)。

RNA:總RNA、mRNA等。

靈敏度:可檢測低至0.5 pg/μL(高靈敏度試劑)至100 ng/μL(寬范圍試劑)。

二、蛋白質定量

兼容多種熒光染料(如Qubit Protein Assay Kit),適合低濃度樣本(0.05–5 mg/mL)。


二、Qubit4.0熒光計核心優(yōu)勢

1、高特異性:熒光染料僅結合目標分子(如dsDNA),避免污染物(如鹽、游離核苷酸)干擾。

2、高靈敏度:比紫外分光光度法(Nanodrop)更準確,尤其適用于低濃度或復雜樣本。

3、操作簡便:觸摸屏界面,預置標準曲線,無需用戶校準。


三、操作步驟

1、試劑準備

選擇對應的檢測試劑盒(如Qubit dsDNA HS Assay Kit)。

將熒光染料與緩沖液按比例混合,配制工作液。

2、標準品檢測

使用試劑盒提供的標準品(通常2個濃度點)建立標準曲線。

3、樣本檢測

將1–20 μL樣本與工作液混合,室溫孵育2–5分鐘。

插入Qubit 4.0,選擇對應檢測程序,讀取濃度。

4、數(shù)據(jù)分析

儀器自動計算濃度,結果可直接導出或保存。


四、注意事項

1、樣本體積:推薦使用1–20 μL,濃度需在試劑檢測范圍內。

2、避免污染:手套操作,防止RNase/DNase污染(核酸檢測時)。

3、染料特異性:不同分子需匹配專用染料(如RNA檢測不可用dsDNA染料)。

4、動態(tài)范圍:超出范圍時需稀釋或換用寬范圍試劑。

TEL:18016231680

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