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技術(shù)文章

thermo賽默飛Qubit4.0熒光定量技術(shù)是什么?

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Qubit 4.0熒光定量技術(shù)是賽默飛世爾(Thermo Fisher Scientific)推出的一種高靈敏度、高特異性的核酸(DNA/RNA)或蛋白質(zhì)定量方法,基于熒光染料與目標分子特異性結(jié)合的原理,通過檢測熒光信號來精確計算濃度。以下是其核心特點和工作原理的詳解:


一、賽默飛qubit4.0熒光計核心特點

1、高靈敏度:可檢測低至0.05 ng/μL的DNA或RNA(比紫外分光光度法如NanoDrop靈敏1000倍)。

2、高特異性:熒光染料僅結(jié)合目標分子(如雙鏈DNA、單鏈DNA或RNA),避免污染物(如鹽、蛋白、游離核苷酸)干擾。

3、寬動態(tài)范圍:無需稀釋即可覆蓋多個數(shù)量級(如DNA檢測范圍0.05–100 ng/μL)。

4、快速操作:僅需1–2 μL樣本,2–3分鐘完成檢測。

5、自動化校準:內(nèi)置標準曲線,儀器自動計算濃度。


二、賽默飛qubit4.0熒光計操作流程

1、配制工作液:將熒光染料與緩沖液按比例混合。

2、加樣:將工作液與樣本加入專用Qubit檢測管。

3、孵育:室溫靜置2–5分鐘(使染料充分結(jié)合)。

4、上機檢測:將檢測管放入Qubit 4.0,選擇對應(yīng)檢測程序(如“dsDNA HS")。

5、讀取結(jié)果:儀器直接顯示濃度(ng/μL)和樣本總量(ng)。


三、賽默飛qubit4.0適用樣本類型

1、核酸:雙鏈DNA(dsDNA)、單鏈DNA(ssDNA)、RNA、microRNA。

2、蛋白:使用專用蛋白檢測試劑盒(如Qubit Protein Assay Kit)。

3、兼容樣本:純化后的DNA/RNA(如來自試劑盒、凝膠回收產(chǎn)物)、細胞裂解液(需避免高濃度去垢劑干擾)。


四、注意事項

1、染料選擇:根據(jù)樣本類型選擇對應(yīng)試劑盒(如高靈敏度dsDNA HS或廣范圍dsDNA BR)。

2、避免污染:使用無核酸酶耗材,操作時戴手套。

3、樣本要求:pH需中性(避免沖突pH值影響染料結(jié)合)。

4、儀器校準:定期使用標準品校準(尤其更換試劑批次時)。

TEL:18016231680

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