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技術文章

選擇要使用Qubit4.0熒光計理由是什么?

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使用Qubit 4.0熒光計(Thermo Fisher Scientific)相比傳統(tǒng)的紫外分光光度計(如NanoDrop)或其他熒光定量方法,具有以下優(yōu)勢,適用于特定的實驗需求:


一、高特異性和準確性

1、僅檢測目標分子:Qubit使用熒光染料(如dsDNA HS/BR、RNA HS染料)特異性結合目標分子(如雙鏈DNA、RNA或蛋白質),避免雜質干擾(如游離核苷酸、單鏈DNA、鹽離子或蛋白質污染)。

對比NanoDrop:紫外吸收法(260 nm)會檢測所有核酸(包括降解片段和污染物),導致濃度高估。

2、低檢測限:

DNA檢測范圍:0.2–1000 pg/μL(高靈敏度模式),適合痕量樣本(如單細胞測序、cfDNA、微量提取產物)。

蛋白質檢測范圍:0.05–5 mg/mL(Protein Assay)。


二、操作簡便且快速

1、無需稀釋:

直接測量1–20 μL原始樣本,無需像紫外法那樣多次稀釋調整吸光度。

2、一鍵式操作:

觸摸屏界面選擇檢測類型(如dsDNA、RNA、Protein),加載樣本后3秒內出結果。

3、內置計算器:

自動計算試劑用量、檢測范圍,支持摩爾濃度轉換和樣本歸一化。


三、適用于低濃度或復雜樣本

1、熒光法的優(yōu)勢:

在以下場景比紫外法更可靠:

樣本濃度極低(如微量DNA文庫、環(huán)境DNA)。

樣本中含污染物(如胍鹽、酚、肝素)。

需要區(qū)分DNA和RNA(如RNA-seq前的質控)。

2、兼容多種試劑盒:

Qubit 4.0支持多種預優(yōu)化試劑盒(如BR/HS染料),覆蓋不同濃度需求。


四、數據管理和合規(guī)性

存儲和導出:

可存儲10,000組數據,支持USB/Wi-Fi導出,符合GLP/GMP要求。

21 CFR Part 11合規(guī)選項:

升級固件后支持電子簽名和審計追蹤(需SAE模式)。


五、何時選擇Qubit 4.0?

1、需要高精度的核酸/蛋白質定量(如qPCR、NGS文庫構建)。

2、樣本濃度低或含污染物。

3、避免紫外法對降解核酸的誤判。


若需更高通量,則選擇Qubit Flex。兩者核心檢測原理一致,Flex在效率上更優(yōu)。

TEL:18016231680

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