在分子生物學實驗領(lǐng)域,
賽默飛Proflex梯度PCR儀憑借其性能占據(jù)著重要地位。熟練掌握其特點與操作技巧,對提升實驗效率和準確性意義重大。
一、儀器特點
(一)靈活的模塊化設(shè)計
Proflex梯度PCR儀提供多達五種可更換的加熱模塊。研究人員可按需選擇,如3×32孔獨立模塊,能同時運行三個獨立的實驗,互不干擾;雙96孔或雙384孔模塊滿足高通量測序需求;雙槽式模塊則支持特定數(shù)字芯片。這種模塊化設(shè)計大大增強了儀器的適用性,無論是少量樣本的精細實驗,還是大規(guī)模的高通量篩查,都能輕松應對。
?。ǘ┫冗M的VeriFlex加熱塊技術(shù)
創(chuàng)新的VeriFlex加熱塊由六個獨立的peltier加熱塊組成。在PCR優(yōu)化過程中,每個加熱塊可獨立設(shè)定特定溫度值,實現(xiàn)精確控溫,極大提高了優(yōu)化效率。并且,六塊peltier加熱塊能同時運行多達六種不同的退火溫度或六個引物對,讓科研人員能在一次實驗中探索多種反應條件,快速找到最佳實驗參數(shù)。
(三)便捷的遠程操作功能
借助免費的移動應用程序或ThermoFisherCloud,科研人員能在任意地點遠程連接儀器。無論身處辦公室、家中,還是外出參加會議,都可隨時查看儀器運行狀態(tài)、獲取模塊可用性通知,甚至遠程編輯和上傳實驗程序。這一功能打破了空間限制,為忙碌的科研工作帶來了極大便利。
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儀器具備出色的溫控精度,溫度均勻性高,變溫速率快。在PCR反應關(guān)鍵的變性、退火、延伸步驟中,能迅速且精準地達到并維持設(shè)定溫度,確保反應的高效性與穩(wěn)定性。即使處理復雜的實驗需求,也能保障結(jié)果的可靠性與重復性。
(五)簡潔易用的操作界面
Proflex配備全新的8.4英寸彩色觸摸屏,圖形用戶界面直觀易懂。實驗人員可通過簡單觸摸操作,快速完成實驗程序的創(chuàng)建、編輯與運行,極大降低了操作門檻。同時,熱學模擬模式能模擬多種舊型號PCR儀的變溫速率,方便習慣舊儀器的用戶快速上手,實現(xiàn)無縫過渡。
二、操作技巧
(一)實驗前準備
仔細檢查儀器外觀,確保無損壞。連接好電源,開機等待儀器完成初始化。
根據(jù)實驗需求,精確配置PCR反應混合物,注意各組分添加順序與量的準確性,避免產(chǎn)生氣泡。
選擇適配的PCR管或孔板,將反應混合物小心加入,確保每管或每孔體積一致,隨后放入儀器加熱模塊,注意放置穩(wěn)固。
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點擊觸摸屏“NewMethods”,若有合適模板可選擇“opentemplate”創(chuàng)建程序,否則選“BlankTemplate”,再選“GeneralPCR”進入設(shè)置界面。
精準設(shè)置溫度、時間、熱蓋溫度、反應體積及循環(huán)數(shù)等參數(shù)。如需添加或刪除步驟、階段,點擊“ManageStages”進行操作。
若需使用梯度功能,點擊“AdvancedOptions”中的“VeriFlex”,合理設(shè)置梯度范圍,一般相鄰梯度間隔0.1-5℃,以篩選最佳退火溫度。
(三)運行與監(jiān)控
程序設(shè)置完成并確認無誤后,保存程序,選擇要使用的加熱模塊,點擊“StartRUN”啟動實驗。
實驗運行中,通過觸摸屏實時監(jiān)控反應進度與溫度曲線,關(guān)注儀器有無異常報警。若需暫停、繼續(xù)或停止實驗,可點擊相應按鈕操作。
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反應結(jié)束,打開熱蓋,小心取出樣本,及時清理儀器內(nèi)部,防止殘留試劑污染。
關(guān)閉儀器電源,保持儀器清潔,定期對儀器進行校準與維護,確保長期穩(wěn)定運行。
賽默飛Proflex梯度PCR儀以其強大特點為科研助力,熟練運用操作技巧,能讓儀器發(fā)揮最大效能,為分子生物學研究提供有力支持。