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賽默飛Qubit4.0與賽默飛NanoDrop哪個(gè)更靈敏?

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Qubit 4.0熒光計(jì)在檢測核酸(DNA/RNA)濃度時(shí),通常比傳統(tǒng)的紫外吸收法(如NanoDrop)更靈敏、更特異,尤其在低濃度樣本或復(fù)雜樣品中優(yōu)勢(shì)明顯。以下是具體對(duì)比:


一、靈敏度對(duì)比

1、Qubit 4.0

檢測下限 :DNA/RNA:低至 0.5 pg/μL(高靈敏度)

線性范圍 :較窄(適合精準(zhǔn)定量低濃度樣本)

樣本體積 :僅需 1-20 μL

2、紫外吸收法(NanoDrop等)

檢測下限 :通常 2-5 ng/μL(依賴樣品純度)

線性范圍 :較寬(可測高濃度樣本,但低端不準(zhǔn))

樣本體積 :需 1-2 μL(但易受污染物干擾)


二、特異性對(duì)比

1、Qubit 4.0:

基于熒光染料(如dsDNA BR Assay),特異性結(jié)合目標(biāo)分子(如雙鏈DNA、單鏈DNA或RNA),幾乎不受游離核苷酸、蛋白質(zhì)、鹽類等干擾。

適合:痕量樣本(如單細(xì)胞測序、cfDNA)、污染物多的樣本(如粗提物)。

2、紫外吸收法:

通過A260吸光度計(jì)算濃度,但會(huì)受雜質(zhì)干擾(如蛋白質(zhì)A280、酚類A270、胍鹽等),導(dǎo)致假性偏高。

適合:快速估算高純度樣本(如柱提后的DNA/RNA)。


三、適用場景

1、優(yōu)先選擇Qubit 4.0:

需要高精度(如NGS文庫定量)。

樣本濃度極低(如環(huán)境DNA、微量提取物)。

樣本含污染物(如胍鹽、酚、蛋白質(zhì))。

2、紫外吸收法的優(yōu)勢(shì):

快速檢測(無需染料孵育)。

可同時(shí)評(píng)估純度(A260/A280、A260/A230比值)。


四、注意事項(xiàng)

1、Qubit的局限性:

需使用特定熒光染料(成本較高)。

每次檢測需標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn)。

無法區(qū)分DNA和RNA(除非使用RNA特異性染料)。

2、紫外吸收法的風(fēng)險(xiǎn):

污染物可能導(dǎo)致濃度虛高(如鹽離子也會(huì)吸收260 nm光)。


五、總結(jié)

1、靈敏度:Qubit 4.0顯著優(yōu)于紫外法,尤其對(duì)低濃度樣本(<10 ng/μL)。

2、準(zhǔn)確性:Qubit受干擾更少,結(jié)果更可靠。

3、效率:紫外法更快,適合初步篩查。

TEL:18016231680

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