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賽默飛371 CO?培養(yǎng)箱是一款高精度、多功能的培養(yǎng)箱，能夠為細胞提供一個穩(wěn)定、無污染的培養(yǎng)環(huán)境。操作步驟主要包括設(shè)備準備、參數(shù)設(shè)置、樣品處理與擺放、運行監(jiān)控以及實驗結(jié)束后的處理等多個環(huán)節(jié)。以下是對這些步驟的詳細闡述：
一、設(shè)備準備
1、安裝與環(huán)境要求：將培養(yǎng)箱放置在平穩(wěn)的臺面上，避免振動，遠離陽光直射、通風口或其他熱源。室溫應(yīng)在 15°C 至 30°C 之間，濕度保持在 30%-70%，確保設(shè)備附近電源接地良好，使用穩(wěn)定的電壓。
2、設(shè)備檢查：檢查電源連接是否牢固，CO?氣瓶壓力是否充足（通常需配備 99.5% 純度以上的醫(yī)療級 CO?），確保門封條完好無損，檢查濕度盤內(nèi)水量是否足夠。
3、開機初始化：插入電源，開啟主電源開關(guān)，等待顯示屏啟動，查看自檢結(jié)果，確認溫度、濕度和 CO?濃度顯示正常，無報警提示。
二、參數(shù)設(shè)置
1、溫度設(shè)置：按操作界面上的 “溫度" 設(shè)置按鈕，輸入目標溫度值（如 37°C，適合大多數(shù)哺乳動物細胞培養(yǎng)），確認并保存，系統(tǒng)會自動調(diào)整至設(shè)定溫度。
2、CO?濃度設(shè)置：按操作界面上的 “CO?濃度" 設(shè)置按鈕，輸入目標 CO?濃度值（一般為 5%），確認并保存，設(shè)備開始調(diào)整內(nèi)部 CO?濃度，確保氣體供應(yīng)正常，觀察濃度是否穩(wěn)定。
3、濕度管理：加入適量去離子水或蒸餾水至濕度盤，避免使用自來水以防止水垢堆積。默認濕度一般保持在 90%-95% RH，無需手動調(diào)節(jié)。
4、校準：溫度校準，根據(jù)標準溫度計核實設(shè)備內(nèi)實際溫度是否與設(shè)定值一致；CO?校準，定期使用校準氣體（如 5% CO?）檢查和調(diào)整傳感器。
三、樣品處理與擺放
1、樣品準備：
樣品容器（如培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿）需提前滅菌，確保樣品無污染。
2、樣品擺放：
將樣品均勻放置在培養(yǎng)箱內(nèi)的擱板上，避免過于密集。
保留足夠的氣流通道，以確保箱內(nèi)溫濕度和CO?濃度均勻。
四、滅菌操作步驟
1、高溫滅菌：
清空培養(yǎng)箱內(nèi)部，移除所有實驗樣品、培養(yǎng)皿以及試劑瓶。
取出可拆卸的內(nèi)部組件（如擱架、濕度水槽、CO?傳感器等），傳感器通常不耐高溫，必須取出或使用保護罩（根據(jù)具體型號說明）。
關(guān)閉CO?鋼瓶，斷開連接。
在控制面板上選擇“高溫滅菌模式"或“Sterilization Cycle"，系統(tǒng)會默認設(shè)置至140°C，時間通常為12小時（包括升溫、滅菌、降溫三個階段）。無需額外調(diào)整，直接確認運行。
滅菌程序結(jié)束后，培養(yǎng)箱會自動冷卻至安全溫度（通常在40°C以下），方可打開門。
冷卻完成后，將拆卸的組件（濕度水槽、擱架、傳感器等）重新安裝回培養(yǎng)箱。
重新連接CO?鋼瓶，確保氣體供應(yīng)正常。
2、手動滅菌（如培養(yǎng)箱內(nèi)部組件不耐高溫）：
使用無腐蝕性的消毒劑（如70%乙醇或過氧化氫溶液）對內(nèi)部進行清潔。
用無絨布擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、門封條和擱架。
對濕度水槽單獨浸泡消毒，并清洗。
如培養(yǎng)箱不自帶紫外線燈，可使用外置UV燈進行滅菌。將紫外線燈放置于培養(yǎng)箱內(nèi)部，保持門關(guān)閉，開啟UV燈運行30分鐘至1小時。
